目的从样本获取方式、储存条件和DNA提取方法等方面探索快速有效、低成本、无创伤、适合于大规模流行病学研究的基因组DNA提取方法。
探索一种快速,有效且对人体无创伤的基因组DNA提取方法.方法比较碘化钾法和
口腔拭子基因组DNA提取试剂盒法对新鲜和室温放置1周的唾液标本的基因组DNA提取和TP53,PRB-3基因PCR扩增效果.同时采集99名健康儿童和成人的唾液标本验证碘化钾法提取唾液基因组DNA的稳定性.结果两种DNA提取方法都能从新鲜唾液标本中获得高质量的基因组DNA,其中碘化钾法的得率和Dzeo/D280分别为(1.91±0.15)/μg和1.99±0.05,试剂盒法分别为(2.64±0.34)μg和1.81±0.02.对于室温放置1周的唾液标本,两种提取方法获得的DNA虽然降解明显,但是对TP53和PRB-3基因都能扩增正确大小的目的片段.碘化钾法提取的99名健康儿童和成人的唾液基因组DNA虽然个体差异明显[得率为(1.89±0.46)μg],但是DNA质量稳定可靠(Dzso/D280为1.96土0.10).结论碘化钾法提取唾液基因组DNA不仅廉价,高效,而且对人体无创伤,非常适合大范围分子流行病学研究