随着对微生物研究的不断深入，科研工作者们发现微生物与人类健康/自然环境的稳态等密切相关，目前二代测序成为微生物多样性研究的主流手段，但很多科研工作者反馈：想研究微生物，取样难呀！今天就给大家送福利来了，主要介绍几种医学研究中难取样本的准备方法，且往下看：
小白鼠肺泡灌洗液
肺部感染是一种常见疾病，病原种类多，耐药性强。支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF）直接取材于病变部位，获得病原菌的机会多，并能大幅减少口咽部定植微生物群对标本的污染，提高病原菌的分离率。
小白鼠肺泡灌洗
一般为颈部和胸部解剖，气管和一侧肺叶结扎。再用穿刺针插入气管上端，生理盐水或PBS反复冲洗，一般为3遍，每遍冲洗次数根据需要决定，3~5次即可，具体操作参考：
1）操作所需的设备（所有设备均需是无菌的）；
2）小白鼠麻醉并固定；
3）颈部去毛并消毒；
4）行颈部正中切口；
5）暴露剥离气管，并在气管近端穿线打活结，活结要比较松；
6）在所打活结的远端，剪开气管的1/2，行气管插管，插入后线打死结；
7）1ml注射器抽取1ml的灭菌生理盐水，通过气管插管注入气管内，注意针头不要插太深，以免损伤肺，反复抽吸三次，将液体抽出，大约能吸出0.7ml左右，放入灭菌离心管内。再抽取1ml生理盐水，重复上面的操作两次，这两次每次能抽出肺泡灌洗液0.9ml左右，也注入离心管，如果回收时遇到很大的阻力即可拔出注射器，收集灌洗液，在灌洗的时候可以轻轻的按摩一下，特别是回抽的时候可以这样做，能够提高回收的效率；
8）收集的灌洗液采用0.22um滤膜过滤后，将滤膜冻存-80℃，或直接提取DNA。
上呼吸道样本制备
上呼吸道感染有70%～80%是由病毒引起的，包括鼻病毒、冠状病毒、腺病毒、流感和副流感病毒、呼吸道合胞病毒、埃可病毒、柯萨奇病毒等。另有20%～30%由细菌引起，细菌感染可直接感染或继发于病毒感染之后，以溶血性链球菌最为常见，其次为流感嗜血杆菌、肺炎球菌、葡萄球菌等。
1.取样材料
无菌棉拭子、含采样液的无菌外旋塑料管。
2.鼻腔取样
尽可能使明亮的光线照进鼻腔，将洁净的鼻咽拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以另一拭子拭另侧鼻孔。将拭子头浸入采样液中，尾部弃去，拧紧盖子。
3.咽喉取样
明亮的光线从检查者肩膀上方照射进张开的口腔，让患者深呼吸，然后发“啊”音，用压舌板轻轻压舌，再用洁净的咽拭子来回擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，然后将拭子头浸入采样液中，尾部弃去，拧紧盖子。
注意事项：
1）咽喉取样时，拭子不能接触到口腔和舌粘膜。
2）取样时间最好在发病72小时内，晨起后。
3）鼻腔和咽部样品，可只收集一种，也可同时收集2种并混合。
皮肤样本制备
洁净的皮肤拭子（无菌棉签）来回擦拭皮肤表面，将拭子或棉签放入无菌管内，－80℃保存，干冰运输即可。建议多擦拭几个拭子，保证取样量。